Nella scelta della colonna capillare giusta per la ns analisi è importante valutare quattro elementi caratteristici della colonna: Fase stazionaria, Diametro della colonna, Spessore del film della fase stazionaria e Lunghezza della colonna
- Fase stazionaria – La fase stazionaria determina la ritenzione relativa dei soluti, l’intervallo di temperatura in cui la colonna può operare e il numero dei piatti teorici richiesti per la separazione (maggiore è la differenza di ritenzione tra i composti da analizzare minore sarà il numero di piatti richiesto).
- Diametro della colonna – L’efficienza di una colonna è inversamente proporzionale al suo diametro: più piccolo è il diametro più alto è il numero di piatti teorici disponibili. Un altro elemento da tenere in considerazione è la “capacità” di una colonna, che significa la quantità di campione che può essere introdotta in una colonna senza saturarla. Più grande è il diametro, più grande è l’area superficiale disponibile e più elevata è la capacità della colonna
- Spessore del film della fase stazionaria – Lo spessore del film riveste un ruolo molto importante poiché influenza:
- Il numero di piatti richiesti per la separazione
- La capacità della colonna
- La temperatura di eluizione dei composti
- L’efficienza della colonna
Aumentando lo spessore del film si aumenta sia la capacità della colonna sia la ritenzione dei composti.
- Lunghezza della colonna – Il numero di piatti teorici di una colonna è funzione della sua lunghezza. Più lunga è la colonna e più alto è il numero dei piatti; tuttavia la risoluzione è funzione della radice quadrata della lunghezza della colonna. Quindi per ottenere una risoluzione doppia tra i due composti, la lunghezza della colonna deve essere quadruplicata! Il tempo di ritenzione varia direttamente con la lunghezza della colonna, usando colonne lunghe si avranno lunghi tempi di analisi.
Nel prossimo post sarà trattata la “Scelta della fase stazionaria”.
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